PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE
BESPLATNI PREGLED PRAVNE REGULATIVE
Brzi pregled sadržaja propisa. Projekt je nastao za potrebe poslovnih ljudi koji kontinuirano prate pravnu regulativu kako bi se
informirali da li je objavljen neki novi propis koji se odnosi na njihovu djelatnost.
Radi brzog pregleda, na ovim stranicama nalazi se sažetak sadržaja, a klikom na link može se pregledati originalni izvor i cijeli sadržaj.
NN 89/2008 • 5.1. Pripremite suspenziju od oko 106 stanica/ml u ultra čistoj vodi.
NN 89/2008 • 5.2. Primijenite postupak FISH (Odjeljak VI.A.7.) s najmanje dvije oligo-probe specifične za R. solanacearum (Dodatak 7).
NN 89/2008 • 5.3. FISH test je pozitivan ako se i kod kulture i kod pozitivne kontrole dobiju iste reakcije.
NN 89/2008 • 6.1. Uzgajajte kulturu 48 sati na 28 °C na triptikaza-soja-agaru (Oxoid).
NN 89/2008 • 6.2. Primijenite odgovarajući FAP postupak (Janse, 1991; Stead, 1992).
NN 89/2008 • 6.3. FAP test je pozitivan ako je profil vjerojatne kulture identičan profilu pozitivne kontrole. Prisutnost karakterističnih masnih kiselina 14:0 3 OH, 16:0 2 OH, 16:1 2 OH i 18:1 2 OH te odsutnost 16:0 3 OH u velikoj mjeri ukazuje na Ralstonia sp.
NN 89/2008 • Kod svakog novog slučaja izolacije R. solanacearum preporučuje se obaviti karakterizaciju soja jednom od sljedećih metoda.
NN 89/2008 • Prema potrebi, u svaki korišteni test uključite poznate referentne sojeve (vidi Dodatak 3).
NN 89/2008 • R. solanacearum se dijeli na biovare na temelju sposobnosti iskorištavanja i/ili oksidiranja tri disaharida i tri heksozna alkohola (Hayward, 1964 i Hayward i sur., 1990). Hranjivi mediji za određivanje biovara opisani su u Dodatku 2. Test se može uspješno obaviti inokuliranjem medija čistim kulturama izolata R. solanacearum te inkubiranjem na 28 °C. Ako se medij rasporedi u 96 sterilnih jažica na ploči za uzgoj stanica (200 µl po jažici), u roku od 72 sata može se uočiti promjena boje od maslinasto zelene na žutu, što znači da je rezultat testa pozitivan.
NN 89/2008 • Molekularna diferencijacija sojeva u kompleksu R. solanacearum može se postići primjenom nekoliko metoda, uključujući sljedeće:
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE
NN 89/2008 • 7.2.1. Analiza polimorfizma duljine restrikcijskih fragmenata (RFLP) (Cook i sur., 1989).
NN 89/2008 • 7.2.2. PCR ponavljajućih sljedova, korištenjem početnica REP, BOX i ERIC (Louws i sur., 1995, Smith i sur., 1995).
NN 89/2008 • 7.2.3. Analiza polimorfizma duljine umnoženih fragmenata (AFLP) (Van der Wolf i sur., 1998).
NN 89/2008 • Specifične PCR početnice (Pastrik i sur., 2002; vidi Dodatak 6) mogu se upotrijebiti za diferencijaciju sojeva koji pripadaju skupini 1 (biovari 3, 4 i 5) i skupini 2 (biovari 1, 2A i 2 T) bakterije R. solanacearum, kako je prvobitno bilo utvrđeno metodom RFLP (Cook i sur., 1989) i sekvenciranjem 16 S rDNK (Taghavi i sur., 1996).
NN 89/2008 • Test patogenosti mora se provesti kao konačna potvrda dijagnoze R. solanacearum i za ocjenu virulentnosti kultura identificiranih kao R. solanacearum.
NN 89/2008 • 2) Inokulirajte 5 do 10 sadnica osjetljivih rajčica ili patlidžana u fazi trećeg pravog lista (vidi Odjeljak VI.A.9).
NN 89/2008 • 3) Inkubirajte do dva tjedna na 25 do 28 °C i uz visoku relativnu vlažnost te ih primjereno zalijevajte pazeći da ne dođe do zasićenja vodom ili venuća zbog nedostatka vode. Kod čistih bi se kultura trebalo pojaviti tipično venuće u roku od 14 dana. Ako nakon ovog razdoblja simptomi nisu prisutni, ne može se potvrditi da je kultura patogeni oblik bakterije R. solanacearum.
NN 89/2008 • 4) Pratite javljaju li se simptomi venuća i/ili epinastije, kloroze i zaostajanja u rastu.
NN 89/2008 • 5) Iz biljaka sa simptomima izdvojite dio stabljike oko 2 cm iznad mjesta inokulacije. Smrvite i suspendirajte u manjem volumenu sterilne destilirane vode ili 50 mM fosfatnog pufera (Dodatak 4). Izolaciju iz suspenzije izvedite razmazom razrjeđenja na prikladnu hranjivu podlogu, po mogućnosti selektivnu (Dodatak 2), inkubirajte 48 do 72 sata na 28 °C te pratite rast kolonija tipičnih za R. solanacearum.
NN 89/2008 • (1) Znanstvenici za vezu: vidi mrežnu stranicu http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main
PRETHODNA STRANICA - SLJEDEĆA
IZBOR:
Broj 83/00, Broj 75/00,
Broj 46/00, Broj 44/97,
Broj 54/03, Broj 91/96
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA ZA PODUZETNIKE