PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE
BESPLATNI PREGLED PRAVNE REGULATIVE
Brzi pregled sadržaja propisa. Projekt je nastao za potrebe poslovnih ljudi koji kontinuirano prate pravnu regulativu kako bi se
informirali da li je objavljen neki novi propis koji se odnosi na njihovu djelatnost.
Radi brzog pregleda, na ovim stranicama nalazi se sažetak sadržaja, a klikom na link može se pregledati originalni izvor i cijeli sadržaj.
NN 89/2008 • Korištenje ove metode kao glavnog testa provjere preporučuje se samo ako ste stručno osposobljeni.
NN 89/2008 • Preliminarno testiranje ovom metodom treba omogućiti ponovljivu detekciju 103 do 104 stanica bakterije C. m. subsp. sepedonicus po ml, koje su dodane ekstraktima uzoraka koji su u prethodnim testiranjima dali negativni rezultat. Kako bi se postigao najveći stupanj osjetljivosti i specifičnosti u svim laboratorijima, mogu biti potrebni pokusi za optimizaciju metode.
NN 89/2008 • Koristite validirane reagense i protokole za PCR. Poželjno je odabrati metodu s internom kontrolom.
NN 89/2008 • Poduzmite odgovarajuće mjere opreza kako biste izbjegli kontaminaciju uzorka ciljnom DNK. Da bi se spriječila kontaminacija ciljnom DNK, PCR test trebali bi obavljati iskusni stručnjaci, u specijaliziranim laboratorijima za molekularnu biologiju.
NN 89/2008 • Negativne kontrole (za ekstrakciju DNK i PCR postupak) treba uvijek obraditi kao zadnje uzorke u postupku kako bi se vidjelo je li došlo do prijenosa DNK.
NN 89/2008 • – ekstrakt uzorka koji je u ranijem testiranju na C. m. subsp. sepedonicus bio negativan,
NN 89/2008 • – alikvote resuspendiranih taloga u koje je dodana bakterija C. m. subsp. sepedonicus (za pripremu vidi Dodatak 2),
NN 89/2008 • – suspenziju u vodi od 106 stanica po ml C. m. subsp. sepedonicus virulentnog izolata (npr. NCPPB 2140 ili NCPPB 4053),
NN 89/2008 • – ako je moguće, u PCR testu upotrijebite i DNK ekstrahiranu iz pozitivnih kontrolnih uzoraka.
NN 89/2008 • Da bi se izbjegla moguća kontaminacija, pozitivne kontrole pripremite prostorno odvojeno od uzoraka za testiranje.
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE
NN 89/2008 • Ekstrakti uzoraka moraju sadržavati što je moguće manje tla. Ako namjeravate primjenjivati PCR protokole, u nekim bi slučajevima, stoga, bilo preporučljivo oprati gomolje prije pripreme ekstrakta.
NN 89/2008 • Koristite uzorke za pozitivnu i negativnu kontrolu kako je gore opisano.
NN 89/2008 • Pripremite kontrolni materijal na jednaki način kao i uzorke.
NN 89/2008 • Postoje različite metode za pročišćavanje ciljne DNK iz kompleksnih uzoraka, kojima se uklanjaju inhibitori PCR reakcije i drugih enzimskih reakcija te se u ekstraktu uzorka koncentrira ciljna DNK.
NN 89/2008 • Sljedeća je metoda optimizirana za korištenje s validiranom PCR metodom koja je navedena u Dodatku 6.
NN 89/2008 • 2. Dodajte 100 µl ekstrakta uzorka i stavite u blok za zagrijavanje ili vodenu kupelj na 95 °C 10 minuta.
NN 89/2008 • 4. Dodajte 80 µl osnovne otopine lizozima (50 mg lizozima po ml u 10 mM Tris HCl, pH 8,0) i inkubirajte na 37 °C 30 minuta.
NN 89/2008 • 5. Dodajte 220 µl Easy DNA® otopine A (Invitrogen), dobro promiješajte na vrtložnoj miješalici i inkubirajte na 65 °C 30 minuta.
NN 89/2008 • 6. Dodajte 100 µl Easy DNA® otopine B (Invitrogen), snažno miješajte na vrtložnoj miješalici sve dok precipitat ne bude slobodno kružio po epruveti i dok uzorak ne bude jednoliko viskozan.
NN 89/2008 • 7. Dodajte 500 µl kloroforma te miješajte na vrtložnoj miješalici dok se viskoznost ne smanji i smjesa postane homogena.
PRETHODNA STRANICA - SLJEDEĆA IZBOR:
Broj 78/99, Broj 30/00,
Broj 65/09, Broj 23/01,
Broj 87/06, Broj 10/94
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA ZA PODUZETNIKE