PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH USLUGA, INTERNET USLUGE
NOVI BRZI PREGLED ZAKONSKE REGULATIVE
Brzi pregled sadržaja propisa. Projekt je nastao za potrebe poslovnih ljudi koji kontinuirano prate pravnu regulativu kako bi se
informirali da li je objavljen neki novi propis koji se odnosi na njihovu djelatnost.
Radi brzog pregleda, na ovim stranicama nalazi se sažetak sadržaja, a klikom na link može se pregledati originalni izvor i cijeli sadržaj.
NN 150/2009 • Ako se u SHK-1 stanicama tijekom virološkog pregleda uzoraka tkiva pojavi potpuni CPU, iz jažice treba odstraniti 400 µl supernatanta i staviti je u sterilnu epruvetu veličine 1,5 ml. Iz ovoga se uzorka ekstrahira RNA, kako je utvrđeno u točki III.1. Dijela III. ovoga Dodatka, te se izvodi RT-PCR. Ukoliko se upotrebljavaju kulture bez potpunog CPU, uklanja se supernatant, stanice se sastružu s površine jažice ili bočice i stave se u sterilnu epruvetu od 1,5 ml radi ekstrahiranja RNA i provođenja RT-PCR.
NN 150/2009 • (c) Nepovezane i nespecifično povezane probe ispiru se s membrane, te se povezane probe vizualiziraju.
NN 150/2009 • (d) Probe povezane s fragmentom od 155 bp (i 310 bp, ako je prisutan) predstavljaju dokaz za specifičnost PCR-a i pokazuju da je u uzorku prisutna RNA virusa ZAL.
NN 150/2009 • Specifičnost PCR-a se može ocijeniti pregledom nukleotidnog slijeda produkta PCR-a od 155 bp.
NN 150/2009 • (c) Nukleotidna sekvenca se uspoređuje s onom za segment 8 virusa ZAL koji je dostupan u EMBL bazi podataka nukleotidnog sekvencioniranja (pristupni brojevi su Y10404, AJ012285, AJ 242016).
NN 150/2009 • (d) Prisutnost slijeda koji odgovara onom za segment 8 virusa ZAL predstavlja dokaz da uzorak sadrži RNA virus ZAL.
NN 150/2009 • V.1. Za pretraživanje otisaka bubrega metodom IFAT uspostavljen je sljedeći protokol
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH USLUGA, INTERNET USLUGE
NN 150/2009 • Svako se stakalce pretraži mikroskopom prikladnim za epi-fluorescentno osvjetljenje, upotrebom odgovarajućeg filtra koji pobuđuje FITC na emitiranje karakteristične zelene fluorescencije. Sva polja unutar područja označenog pomoću olovke ImmEdgeTM pretražuju se pod objektivima x10 i x20, a sumnjiva područja (ona koja pokazuju zelenu fluorescenciju) dodatno se pretražuju pod objektivom x40 i fazno/fluorescentnim osvjetljenjem kako bi bili sigurni da je fluorescentna obojenost povezana sa stanicama. Fazne koordinate sumnjivih područja treba zabilježiti radi kasnijeg potvrđivanja prirode fluorescencije koje obavlja drugi ispitivač. Nakon pregleda koji obavi prvi ispitivač, stakalca koja su pozitivna ili sumnjiva ponovno pretražuje drugi ispitivač i potvrđuje rezultate.
NN 150/2009 • V.4.1. Za svaku seriju stakalaca obojenih za IFAT, moraju biti uključena tri tipa kontrole:
NN 150/2009 • – otisak bubrega od nezaraženog atlantskog lososa (negativna kontrola),
NN 150/2009 • – stanična kultura SHK-1 ili druga prijemljiva stanična kultura zaražena virusom ZAL (pozitivna kontrola).
NN 150/2009 • V.4.2. Ukoliko je dostupno kao dodatna pozitivna kontrola, preporučuje se otisak bubrega od atlantskog lososa zaraženog virusom ZAL.
NN 150/2009 • Ova se tehnika može primijeniti na druga tkiva ribe, kao što su jetra, slezena i srce, pod uvjetom da se na stakalce može prenijeti dovoljna količina endotelnih stanica, leukocita ili limfocita. Postupak bojenja ostaje isti za sva tkiva, iako je kod nekih tkiva bolje izostaviti bojenje propidijevim jodidom, očekujući da će se tipovi stanica prisutni u otisku identificirati faznim osvjetljenjem.
NN 150/2009 • Djelići preparirani parafinom režu se na veličinu od 5 µm i boje upotrebom hematoksilina i eozina. Histološke promjene povezane s ZAL opisane su u trenutno važećem izdanju OIE Dijagnostičkog priručnika za bolesti životinja akvakulture.
PRETHODNO - SLJEDEĆA STRANICA
IZBOR:
Broj 87/09, Broj 57/00,
Broj 42/95, Broj 25/04,
Broj 112/09, Broj 34/93
LINK - VODIČ KROZ POSLOVNE USLUGE KOJE SU VAM DOSTUPNE