PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE
BESPLATNI PREGLED PRAVNE REGULATIVE
Brzi pregled sadržaja propisa. Projekt je nastao za potrebe poslovnih ljudi koji kontinuirano prate pravnu regulativu kako bi se
informirali da li je objavljen neki novi propis koji se odnosi na njihovu djelatnost.
Radi brzog pregleda, na ovim stranicama nalazi se sažetak sadržaja, a klikom na link može se pregledati originalni izvor i cijeli sadržaj.
NN 89/2008 • 10.4. Izolirajte iz biljaka sa simptomima tako da odstranite dio stabljike 2 cm iznad mjesta inokulacije. Usitnite i suspendirajte u maloj količini sterilne destilirane vode ili 50 mM fosfatnog pufera (Dodatak 3). Izolirajte iz suspenzije razmazom na MTNA i YPGA (Dodatak 5), inkubirajte tri do pet dana na 21 do 23 °C i pregledajte jesu li narasle tipične kolonije bakterije C. m. subsp. sepedonicus.
NN 89/2008 • Priprema pozitivnih i negativnih kontrola za osnovne testove provjere, PCR/IF i FISH
NN 89/2008 • Uzgojite 72-satnu kulturu virulentnog soja bakterije C. m. subsp. sepedonicus (NCPPB 4053 ili PD 406) na MTNA osnovnoj hranjivoj podlozi i suspendirajte u 10 mM fosfatnom puferu da dobijete gustoću stanica od približno 1 do 2 × 108 cfu po ml. To je obično slabo mutna suspenzija optičke gustoće od 0,20 na 600 nm.
NN 89/2008 • Odstranite jezgre pupaka iz 200 gomolja krumpira sorte s bijelom korom za koje je poznato da je nisu zaraženi bakterijom C. m. subsp. sepedonicus.
NN 89/2008 • Obradite pupke uobičajenom metodom i resuspendirajte talog u 10 ml.
NN 89/2008 • Pripremite 10 sterilnih mikroepruveta od 1,5 ml s 900 µl resuspendiranog taloga.
NN 89/2008 • U prvu mikroepruvetu dodajte 100 µl suspenzije C. m. subsp. sepedonicus. Promiješajte na vrtložnoj miješalici.
NN 89/2008 • U sljedećih pet mikroepruveta pripremite decimalna razrjeđenja.
NN 89/2008 • Ovih šest mikroepruveta s kontaminiranim ekstraktom koristite za pozitivnu kontrolu. Četiri mikroepruvete s nekontaminiranim ekstraktom koristite za negativnu kontrolu. U skladu s tim, označite mikroepruvete.
NN 89/2008 • Pripremite alikvote od 100 µl u mikroepruvetama od 1,5 ml tako da dobijete devet kopija svakog kontrolnog uzorka. Do uporabe ih pohranite na – 16 do – 24 °C.
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE
NN 89/2008 • Prisutnost i količinu C. m. subsp. sepedonicus u kontrolnim uzorcima potvrdite najprije IF testom.
NN 89/2008 • Za PCR test, obavite ekstrakciju DNK na pozitivnim i negativnim kontrolnim uzorcima za svaku seriju uzoraka za testiranje.
NN 89/2008 • Za IF i FISH testove, obavite testove na pozitivnim i negativnim kontrolnim uzorcima za svaku seriju uzoraka za testiranje.
NN 89/2008 • Kod IF, FISH i PCR testova, bakterija C. m. subsp. sepedonicus se mora detektirati u najmanje 106 i 104 stanica/ml pozitivnih kontrola i niti u jednoj negativnoj kontroli.
NN 89/2008 • OPĆENITO: Neotvoreni sterilizirani puferi mogu se čuvati do jedne godine.
NN 89/2008 • Ovaj se pufer koristi za ekstrakciju bakterije iz biljnih tkiva homogenizacijom ili tresenjem.
NN 89/2008 • Otopite sastojke, provjerite pH i sterilizirajte u autoklavu na 121 °C 15 minuta.
NN 89/2008 • Ovaj se pufer koristi za resuspendiranje i razrjeđivanje ekstrakta jezgre pupaka gomolja krumpira, nakon koncentriranja u talog centrifugiranjem.
NN 89/2008 • Otopite sastojke, provjerite pH i sterilizirajte u autoklavu na 121 °C 15 minuta.
NN 89/2008 • 2.1. IF pufer (10 mM fosfatni pufer s dodatkom soli (PBS), pH 7,2)
PRETHODNA STRANICA - SLJEDEĆA
IZBOR:
Broj 109/03, Broj 55/02,
Broj 20/90, Broj 90/92,
Broj 31/09, Broj 19/90
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA ZA PODUZETNIKE