PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE Pregled usluga
BESPLATNI PREGLED PRAVNE REGULATIVE
Brzi pregled sadržaja propisa. Projekt je nastao za potrebe poslovnih ljudi koji kontinuirano prate pravnu regulativu kako bi se informirali da li je objavljen neki novi propis koji se odnosi na njihovu djelatnost. Radi brzog pregleda, na ovim stranicama nalazi se sažetak sadržaja, a klikom na link može se pregledati originalni izvor i cijeli sadržaj.
Stranica HR2008-12-142-3952 NN 142/2008

• Konačni omjer tkiva i transportnog medija mora se u laboratoriju postaviti u omjer 1:10.

Stranica 2008-12-142-3952 NN 142/2008

• Homogenizat se centrifugira u centrifugi ohlađenoj pri 2 do 5°C na brzini 2000 do 4000 x g u trajanju 15 minuta, i taj se supernatant prikuplja i obrađuje ili četiri sata na 15°C ili preko noći na 4°C sa antibioticima; u ovoj fazi može biti koristan gentamicin 1 mg/ml.

Stranica 2008-12-142-3952 NN 142/2008

• Ukoliko je uzorak poslan u transportnom mediju (tj. izložen antibioticima), može se izostaviti obrada supernatanta antibioticima.

Stranica 2008-12-142-3952 NN 142/2008

• Svrha obrade antibioticima je suzbijanje bakterijske kontaminacije uzorka, tako da nije potrebna filtracija kroz membranske filtre.

Internet NN 142/2008
• Ukoliko se prikupljeni supernatant pohrani na –80°C unutar 48 sati od prikupljanja, može se još samo jednom ponovo upotrijebiti za virološke pretrage.
Internet stranice NN 142/2008
• Ako je zbog praktičnih poteškoća (npr. kvar inkubatora, problemi sa staničnim kulturama itd.) nemoguće inokulirati stanice unutar 48 sati od prikupljanja uzoraka tkiva, supernatant se može zamrznuti na temperaturi od –80°C, a virološko pretraživanje obaviti unutar 14 dana.
Internet stranice NN 142/2008 • Prije inokulacije stanica, supernatant se pomiješa s jednakim dijelovima odgovarajuće razrijeđenih skupina antiseruma za lokalne serotipove virusa ZNG te se s njima inkubira najmanje jedan sat na 15°C ili najviše 18 sati na 4°C. Titar antiseruma mora biti najmanje 1/2000 s neutralizacijom plaka od 50% u testu neutralizacije.
Internet stranice NN 142/2008 • Svrha tretiranja svih inokuluma antiserumom za virus ZNG (virus koji se u nekim dijelovima Europe javlja u 50% uzoraka ribe) je spriječiti da se u inokuliranim staničnim kulturama razvije citopatogeni učinak (CPE) zbog virusa ZNG. To će skratiti trajanje viroloških pretraga i smanjiti broj slučajeva u kojima bi se pojava CPU-a morala smatrati potencijalnim znakom prisutstva virusa VHS-a ili ZHN-a.
Internet stranice NN 142/2008 • Ako uzorci potječu iz proizvodnih jedinica koje se smatraju slobodnim od ZNG-a, može se izostaviti tretiranje inokuluma antiserumom za virus ZNG-a.
Internet stranice NN 142/2008 • Stanice BF-2 ili RTG-2 i EPC ili FHM umnožavaju se na temperaturi od 20 do 30°C u odgovarajućem mediju, npr. Eaglovom MEM-u (ili njegovim modifikacijama), obogaćenom s 10% fetalnog goveđeg seruma i antibioticima u standardnim koncentracijama.
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE Pregled
Vijesti NN 142/2008 • Ako se stanice umnažaju u zatvorenim posudama, preporučuje se puferiranje medija bikarbonatom. Medij koji se koristi za kulturu stanica u otvorenim jedinicama može se puferirati Tris-HCL-om (23 mM) i Na-bikarbonatom (6 mM). Ph mora biti 7,6 ± 0,2.
Informacije NN 142/2008 • Stanične kulture koje će se koristiti za inokuliranje s tkivnim materijalom trebaju biti mlade (stare 4 do 48 sati) i pri inokuliranju moraju biti u fazi aktivnog rasta (bez zgrušavanja).
Poslovne stranice NN 142/2008 • Suspenzija organa tretirana antibioticima inokulira se u stanične kulture u dva razrjeđenja, tj. osnovnom razrjeđenju i, pored toga, njegovom razrjeđenju 1:10, što dovodi do konačnih razrjeđenja tkivnog materijala u staničnoj kulturi 1:100 odnosno 1:1000 (kako bi se spriječila homologna interferencija). Moraju se inokulirati najmanje dvije stanične linije (vidi točku 1. ovoga Poglavlja). Omjer veličine inokuluma i količine stanične kulture treba biti 1:10.
Pregledi NN 142/2008 • Za svako razrjeđenje i svaku staničnu liniju mora se upotrijebiti najmanje oko 2 cm2 površine stanica, što odgovara jednoj jažici na 24 jažičnoj plitici za staničnu kulturu. Preporučuje se korištenje plitica za staničnu kulturu, ali su prihvatljive i druge jedinice sa sličnim ili većim površinama za rast.
Besplatno NN 142/2008 • Inokulirane stanične kulture inkubiraju se 7 do 10 dana pri 15°C. Ako se boja medija za staničnu kulturu promijeni s crvene u žutu, što ukazuje na zakiseljenje medija, mora se prilagoditi pH pomoću sterilne otopine bikarbonata ili odgovarajućim tvarima kako bi se osigurala osjetljivost stanica na virusnu infekciju.
Glasnik NN 142/2008 • Najmanje svakih šest mjeseci ili ako se sumnja na smanjenu osjetljivost stanica, obavlja se titracija zamrznutih pohranjenih virusa VHS-a i ZHN-a kako bi se verificirala osjetljivost staničnih kultura na infekciju. Preporučeni postupak opisan je u Dijelu IV. ovoga Dodatka.
Propis NN 142/2008 • Inokulirane stanične kulture moraju se redovito pregledavati (najmanje tri puta tjedno) na pojavu citopatogenog učinka (CPU) pri povećanju od 40 do 150 puta. Ako se opazi očiti citopatogeni učinak (CPU), odmah treba početi s postupkom identifikacije virusa u skladu s Poglavljem IV. ovoga Dijela.
Propis NN 142/2008 • Ako se nakon primarne inkubacije od 7 do 10 dana ne razvije citopatogeni učinak (CPU), provodi se supkultiviranje na svježim staničnim kulturama korištenjem površine slične površini primarne kulture.
Propis NN 142/2008 • Alikvoti hranjive podloge (supernatant) svih kultura/jažica, koje čine primarnu kulturu, puliraju se prema staničnoj liniji 7 do 10 dana nakon inokulacije. Tako dobiveni skupni uzorci inokuliraju se u homologne stanične kulture, nerazrijeđene i razrijeđene 1:10 (pri čemu se dobiju konačna razrijeđena supernatanta u omjeru 1:10 odnosno 1:100), kako je opisano u točki 2. ovoga Poglavlja. Druga je mogućnost da se alikvoti 10% hranjive podloge koja čini primarnu kulturu inokuliraju izravno u jažicu sa svježom staničnom kulturom (supkultiviranje iz jažice u jažicu). Inokulaciji može prethoditi preinkubacija razrjeđenja s antiserumom za virus IPN u odgovarajućem razrjeđenju kako je opisano u Poglavlju II. točki 3. ovoga Dijela.
Propis NN 142/2008 • Inokulirane kulture se potom inkubiraju 7 do 10 dana pri 15°C i promatraju kako je opisano u točki 4.ovoga Poglavlja.
PRETHODNA STRANICA - SLJEDEĆA IZBOR: Broj 102/09, Broj 141/04, Broj 48/99, Broj 69/03, Broj 133/05, Broj 34/91
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA ZA PODUZETNIKE Pregled