PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE 
BESPLATNI PREGLED PRAVNE REGULATIVE
Brzi pregled sadržaja propisa. Projekt je nastao za potrebe poslovnih ljudi koji kontinuirano prate pravnu regulativu kako bi se
informirali da li je objavljen neki novi propis koji se odnosi na njihovu djelatnost.
Radi brzog pregleda, na ovim stranicama nalazi se sažetak sadržaja, a klikom na link može se pregledati originalni izvor i cijeli sadržaj.
NN 89/2008 • Kada se PCR test koristi kao glavni test provjere i rezultat je pozitivan, mora se provesti IF test ili izolacija kao drugi obvezni test provjere. Kada se PCR test koristi kao drugi test provjere i rezultat je pozitivan, za postavljanje konačne dijagnoze potrebno je daljnje testiranje prema dijagramu.
NN 89/2008 • Korištenje ove metode kao glavnog testa provjere preporučuje se samo ako ste stručno osposobljeni.
NN 89/2008 • Preliminarno testiranje ovom metodom treba omogućiti ponovljivu detekciju 103 do 104 stanica bakterije R. solanacearum po ml, koje su dodane ekstraktima uzoraka koji su u prethodnim testiranjima dali negativni rezultat. Kako bi se postigao najveći stupanj osjetljivosti i specifičnosti u svim laboratorijima, mogu biti potrebni pokusi za optimizaciju metode.
NN 89/2008 • Koristite validirane reagense i protokole za PCR (vidi D(vidi Dodatak 6). Poželjno je odabrati m internom kontrolom.
NN 89/2008 • Poduzmite odgovarajuće mjere opreza kako biste izbjegli kontaminaciju uzorka ciljnom DNK. Da bi se spriječila kontaminacija ciljnom DNK, PCR test trebali bi obavljati iskusni stručnjaci, u specijaliziranim laboratorijima za molekularnu biologiju.
NN 89/2008 • Negativne kontrole (za ekstrakciju DNK i PCR postupak) treba uvijek obraditi kao zadnje uzorke u postupku kako bi se vidjelo je li došlo do prijenosa DNK.
NN 89/2008 • – ekstrakt uzorka koji je u ranijem testiranju na R. solanacearum bio negativan
NN 89/2008 • – alikvote resuspendiranih taloga u koje je dodana bakterija R. solanacearum (za pripremu vidi Dodatak 3B).
NN 89/2008 • – ako je moguće, u PCR testu upotrijebite i DNK ekstrahiranu iz pozitivnih kontrolnih uzoraka.
NN 89/2008 • Da bi se izbjegla moguća kontaminacija, pozitivne kontrole pripremite prostorno odvojeno od uzoraka za testiranje.
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE
NN 89/2008 • Ekstrakti uzoraka moraju sadržavati što je moguće manje tla. Ako namjeravate primjenjivati PCR protokole, u nekim bi slučajevima bilo preporučljivo oprati gomolje prije pripreme ekstrakta.
NN 89/2008 • U Dodatku 3. navedeni su standardizirani pozitivni i negativni kontrolni materijali koji se mogu koristiti u ovim testovima.
NN 89/2008 • Koristite uzorke za pozitivnu i negativnu kontrolu kako je gore opisano (vidi Dodatak 3).
NN 89/2008 • Postoje različite metode za pročišćavanje ciljne DNK iz kompleksnih uzoraka, kojima se uklanjaju inhibitori PCR reakcije i drugih enzimskih reakcija te se u ekstraktu uzorka koncentrira ciljna DNK. Sljedeća je metoda optimizirana za korištenje s validiranim PCR metodama koje su navedene u Dodatku 6.
NN 89/2008 • 2) Dodajte 100 µl ekstrakta uzorka i stavite u blok za zagrijavanje ili vodenu kupelj na 95 °C 10 minuta.
NN 89/2008 • 4) Dodajte 80 µl osnovne otopine lizozima (50 mg lizozima na ml u 10 mM Tris-HCl, pH 8,0) te inkubirajte 30 minuta na 37 °C.
NN 89/2008 • 5) Dodajte 220 µl Easy DNA® otopine A (Invitrogen), dobro promiješajte na vrtložnoj miješalici i inkubirajte 30 minuta na 65 °C.
NN 89/2008 • 6) Dodajte 100 µl Easy DNA® otopine B (Invitrogen), snažno miješajte na vrtložnoj miješalici sve dok precipitat ne bude slobodno kružio po epruveti i dok uzorak ne bude jednoliko viskozan.
NN 89/2008 • 7) Dodajte 500 µl kloroforma te miješajte na vrtložnoj miješalici dok se viskoznost ne smanji i smjesa postane homogena.
NN 89/2008 • 8) Centrifugirajte na 15000 g 20 minuta na 4 °C da se odijele faze i stvori interfaza.
PRETHODNA STRANICA - SLJEDEĆA 
IZBOR:
Broj 3/08, Broj 52/07,
Broj 50/90, Broj 133/05,
Broj 116/03, Broj 8/02
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA ZA PODUZETNIKE