PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE
BESPLATNI PREGLED PRAVNE REGULATIVE
Brzi pregled sadržaja propisa. Projekt je nastao za potrebe poslovnih ljudi koji kontinuirano prate pravnu regulativu kako bi se
informirali da li je objavljen neki novi propis koji se odnosi na njihovu djelatnost.
Radi brzog pregleda, na ovim stranicama nalazi se sažetak sadržaja, a klikom na link može se pregledati originalni izvor i cijeli sadržaj.
NN 150/2009 • II.3.1. Uzorci krvi i epruvete koje sadrže tkivo riba namijenjeno za virološki pregled ili RT-PCR analizu stavljaju se u izolirane posude (npr. kutije od polistirena s debelim stjenkama) zajedno s dovoljnom količinom leda ili ‘rashladnih blokova’ kako bi se osiguralo rashlađivanje uzoraka tijekom prijevoza u laboratorij. Treba izbjegavati zamrzavanje, a pri dolasku na odredište u kutijama za prijevoz još uvijek mora biti leda ili jedan ili više ‘rashladnih blokova’ koji moraju još uvijek biti djelomično ili potpuno zamrznuti. U izuzetnim okolnostima uzorci za RT-PCR analizu ili za virološki pregled mogu se naglo zamrznuti i transportirati u laboratorij pri temperaturi od – 20 °C ili nižoj.
NN 150/2009 • II.3.2. Predmetna stakalca za IFAT šalju se u spremnicima za predmetna stakalca s dovoljno sredstva za isušivanje kako bi otisci ostali suhi i rashlađeni, kako je gore opisano.
NN 150/2009 • II.3.3. Ako se tkiva šalju u fiksiru za histološki pregled, treba ih slati u zatvorenim epruvetama u ambalaži otpornoj na vanjske utjecaje, kao što su kutije od polistirena s debelim stijenkama.
NN 150/2009 • II.3.4. Osim u slučaju kada su uzorci zamrznuti, virološki pregled mora započeti što je prije moguće a ne kasnije od 72 sata nakon uzimanja uzoraka. Uzorak za dodatnu kontrolnu analizu pohranjuje se po dolasku u laboratorij na temperaturu od – 20 °C ili nižoj.
NN 150/2009 • II.3.5. U laboratorij se mogu dopremiti i cijele ribe ukoliko su tijekom prijevoza ispunjeni temperaturni zahtjevi, kako je opisani u točki II.3.1. Cijela se riba omota u upijajući papir i šalje u plastičnoj vrećici, rashlađena na gore opisani način.
NN 150/2009 • II.3.6. Živa riba može se također poslati, ali samo pod nadzorom nadležne službe.
NN 150/2009 • II.3.7. Za RT-PCR analizu tkiva pohranjenih u RNAlater, ekstrakcija RNA se mora obaviti unutar određenog vremenskog razdoblja ovisno o tome na kojoj su temperaturi uzorci pohranjeni. Ta vremenska razdoblja su sljedeća:
NN 150/2009 • II.3.8. Pakiranje i označavanje se mora obaviti u skladu s postojećim nacionalnim i međunarodnim propisima za prijevoz.
NN 150/2009 • Uz suglasnost dijagnostičkog laboratorija, mogu se prikupiti i pripremiti i druga tkiva riba za dodatno ispitivanje.
NN 150/2009 • III.1.1. Kada dođe do praktičnih poteškoća koje onemogućavaju inokulaciju stanica unutar roka od 72 sata nakon prikupljanja uzoraka tkiva, prihvatljivo je zamrzavanje tkiva na – 80 °C tijekom 28 dana. Tkivo se prije virološkog ispitivanja smije zamrznuti i odmrznuti samo jedanput.
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA, INTERNET USLUGE
NN 150/2009 • Tretiranje svih inokulata antiserumom za virusa ZNG (virus koji se u nekim dijelovima Europe pojavljuje u 50% ribljih uzoraka) ima za cilj sprječavanje razvoja citopatogenog učinka (CPU) uzrokovanog razvojem virusa ZNG u inokuliranim staničnim kulturama. Time se skraćuje trajanje virološkog ispitivanja te se smanjuje broj slučajeva u kojima bi se pojava CPU morala smatrati kao moguća pokazatelj virusa ZAL.
NN 150/2009 • Kada uzorci dolaze iz proizvodnih jedinica za koje se smatra da u njima nema ZNG, može se izostaviti tretiranje inokulata antiserumom za virus ZNG.
NN 150/2009 • III.2.1. Stanice SHK-1 (pasaža 80 ili manje) ili stanice TO uzgajaju se u mediju L-15 koji sadrži 5% fetalni goveđi serum, 2% (v/v) 200 mM L-glutamin i 0,08% (v/v) 50 mM 2-merkaptoetanol, na pliticama s 12 ili 24 jažice. Mogu se upotrijebiti i druge stanične linije s dokazanom djelotvornošću i osjetljivošću za izolaciju virusa ZAL, uvažavajući varijabilnost sojeva i sposobnosti različitih sojeva da se umnožavaju u različitim staničnim linijama. Suspenzija organa tretirana antiserumom inokulira se u mlade stanične kulture u fazi aktivnog rasta kako bi se dobio konačno razrijeđeni tkivni materijal u hranljivoj podlozi u omjeru od 1 : 1 000. Za svaku suspenziju organa dodaje se 40 µl inokulata u jednu jažicu koja sadrži 2 ml hranljive podloge. Kako bi se smanjio rizik od unakrsne kontaminacije preporučuje se da se upotrebljavaju posebne plitice s 12 ili 24 jažice za uzorke iz različitih ribogojilišta.
NN 150/2009 • III.2.2. Jedna plitica se ostavlja neinokulirana da bi služila kao negativna kontrola. Odvojena plitica se inoklulira referentnim izolatom virusa ZAL kao pozitivna kontrola, na sljedeći način. Sto µl standardnog pripravka virusa ZAL (minimalni titar 107 TCID50 ml-1) inokulira se u prvu jažicu i dobro promiješa. Određeni dio materijala iz prve jažice prenosi se u drugu jažicu da bi se dobila otopina s omjerom 1 : 10 i dobro se promiješa. Ovaj se postupak ponavlja kroz cijelu pliticu da bi se dobilo šest deseterostrukih razrjeđenja. Standardni virus ZAL se može pohraniti na – 80 °C najmanje dvije godine, ali kada se jednom odmrzne mora se upotrijebiti u roku od tri dana. Napomena: treba paziti da ne dođe do unakrsne kontaminacije testne plitice s pozitivnim kontrolnim materijalom. Kako bi se izbjegao ovaj rizik, pozitivne kontrole se pripremaju i njima se rukuje odvojeno od testne plitice.
NN 150/2009 • III.2.3. Uzorci se inkubiraju pri 14 ± 2 °C kroz razdoblje do 15 dana.
NN 150/2009 • Stanične kulture se dva puta mikroskopski pregledavaju na pojavu CPU-a, između petog i sedmog i između 12. i 14. dana nakon inokulacije. Ako bilo koji skupni uzorak pokaže CPU, mora se odmah započeti s postupcima identifikacije virusa u skladu s točkom III.6.ovoga Dijela Dodatka. Ako se do 14 dana ne zapazi CPU, izvodi se test hemadsorpcije u skladu s točkom III.4. ovoga Dijela Dodatka.
NN 150/2009 • Umnožavanje virusa ZAL u staničnim kulturama ne rezultira uvijek CPU-om. Stoga se svaka jažica podvrgava testu hemadsorpcije, kako je dolje opisano, ili se alternativno svaka rupica podvrgava IF testu, kako je opisano u točki III.6.1. ovoga Dijela Dodatka.
NN 150/2009 • III.4.1. Hranljiva podloga stanične kulture uklanja se iz svake jažice, uključujući one koje se koriste za pozitivnu i negativnu kontrolu, te se stavljaju u obilježene sterilne epruvete. Petsto µl 0,2% (v/v) suspenzije ispranih crvenih krvnih zrnaca kunića ili konja, ili 0,05 % (v/v) suspenzije ispranih crvenih krvnih zrnaca kalifornijske pastrve ili atlantskog lososa dodaje se u svaku jažicu i inkubira 45 minuta na sobnoj temperaturi. Crvena krvna zrnca se odstrane i svaka se jažica dva puta ispere medijem L-15. Svaka se jažica mikroskopski pregleda.
NN 150/2009 • III.4.2. Postojanje nakupina stanica crvenih krvnih zrnaca pričvršćenih uz površinu SHK-1 ili TO stanica ukazuje na vjerojatnu zarazu ortomiksovirusom. Ako je test hemadsorpcije pozitivan, treba odmah izvesti test identifikacije virusa u skladu s točkom III.6. ovoga Dijela Dodatka karakterističnih znakova navedenih bolesti.
NN 150/2009 • III.5.1. Subkuktiviranje se izvodi između 13. i 15. dana. Dvjesto dvadeset pet µl supernatanta kulture dodaje se u jažice koje sadrže svježe stanice SHK-1 u fazi aktivnog rasta, na ploči s 12 jažica, te se do 18 dana inkubira na temperaturi od 14 ± 2 °C. Stanična kultura se dva puta mikroskopski pregleda na pojavu CPU-a, i to između petog i sedmog i između 14. i 18. dana nakon inokulacije. Ako bilo koji skupni uzorak pokaže CPU, treba odmah izvesti test identifikacije virusa u skladu s točkom III.6. ovoga Dijela Dodatka. Ako se između 14. i 18. dana ne zapazi CPU, treba izvesti test hemadsorpcije u skladu s točkom III.4. ovoga Dijela Dodatka.
PRETHODNA STRANICA - SLJEDEĆA
IZBOR:
Broj 127/09, Broj 79/06,
Broj 35/93, Broj 22/04,
Broj 114/05, Broj 133/05
LINK - PREGLED SVIH FINANCIJSKIH I POSLOVNIH TEMA ZA PODUZETNIKE